素链霉素溶液含胰蛋白酶溶液均购自武汉普诺赛生命科技有限公司胎牛血清购自美国程，王廷祥，娄国强，施军平异欧前胡素对人胃癌细胞的凋亡诱导作用的研究国际消化病杂志，那袭雪，张文涛，谈远锋，等绿原酸及其异构体药理作用及不良反应研究进展辽宁中医药大学学报，吴竞，王廷祥，魏楠，等阿魏酸抑制肺癌移植瘤生长及其机制研究浙江医学廖雪，蔺婷，罗晶婧，等益气解毒方水提物对肿瘤基础与临床，何丹益气解毒方诱导鼻咽癌侧群细胞凋亡的研究长沙湖南中医药大学，蔺婷自噬在益气解毒方诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用研究长沙湖南中医药大学，罗晶婧益气解毒方水提物联合盐霉素抑制鼻咽癌细胞增殖迁移和诱导凋亡的效应长沙湖南中医药大学，王化修，田道法，吴新正益气解毒方对益气解毒方中苯丙素类化合物对鼻咽癌细胞增殖效应的影响鼻咽癌论文蛋白表达均下调，且差异具有统计学意义。综上，本研究表明，益气解毒方中苯丙素类化合物异欧前胡素阿魏酸及绿原酸可以抑制人细胞增殖。异欧前胡素抑制增殖效应出现较慢，但出现形态异常时间较早，且抑制增殖效应较明显绿原酸虽出现抑制增殖效应较早，抑制增殖效应较弱些阿魏酸抑制增殖效应及出现形态异常较早，但抑制增殖效应为者中最弱。种苯丙素类化合物均可损伤细胞，使其细胞形态发生改变。异欧前胡素阿魏酸及绿原酸抑制细胞增殖作用可能通过下调及表达来完成。本研究对益气解毒方中苯丙素类化合物异欧前胡素阿魏酸及绿原酸抑制细胞增殖了进步探讨益气解毒方中苯丙素类化合物是否抑制了细胞的增殖，者之间效应有何不同，本研究通过监测细胞增殖曲线形态改变及增殖相关蛋白质水平表达差异等方式进行研究。通过监测板孔内电阻抗变化，分析得出的可以揭示细胞增殖死亡迁移等行为，有利于精确指导和改进实验设计。多功能细胞成像微孔板检测系统可实时监测细胞形态并拍照记录，对活细胞进行动态监测与多维分析。是个重要的细胞增殖相关蛋白，其可以在复制叉处协调大部分代谢反应，包括复制和修复等，还可以通过表皮生长因子受体在酪氨酸上的磷酸化修饰，过度表达及活化与多实时无标记细胞功能分析技术动态监测不同浓度的种苯丙素类化合物对离体人鼻咽癌细胞生长曲线的影响高通量活细胞成像分析检测系统分别监测种不同浓度苯丙素类化合物对人鼻咽癌细胞形态改变法检测种苯丙素类化合物对人鼻咽癌细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原连锁的凋亡蛋白抑制剂表达的影响。结果实时监测结果显示异欧前胡素阿魏酸绿原酸均能不同程度地抑制细胞增殖，存在药物浓度越高抑制效应越明显的趋势。检测结果显示，与对照组相比，种苯丙素类化合物作用后，大量细胞出现多功能细胞成像微孔板检测系统监测细胞形态取对数生长期的细胞，胰酶消化，制成单细胞悬液，每孔细胞悬液接种于孔培养板中，控制细胞密度为个孔，细胞贴壁生长，弃去原培养液，每孔加入含药培养基或含溶剂培养基，实验分组对照组异欧前胡素组阿魏酸组绿原酸组，药物组浓度均为。将孔板放置于检测系统中继续培养，设定每进行次全板自动图像捕获及分析细胞形态图像，监测细胞生长形态。检测蛋白表达取对数生长期的细胞，传代至细胞培养皿中，细胞贴壁生长后弃去原培养液，加入含药培养基或含溶剂培养基，实验分组同，置于继续培养后提取总蛋白并进行殖的效应更显著，加药处理后细胞增殖速度减慢并伴有大量细胞脱壁漂浮，细胞核固缩碎裂变形，胞内容物外翻等形态变化，绿原酸则是加药处理后出现明显形态变化。见图。益气解毒方中苯丙素类化合物对细胞增殖相关蛋白的影响与对照组相比，加药组的细胞增殖相关蛋白及细胞生存蛋白凋亡抑制蛋白表达量均不同程度的降低，且差异具有统计学意义或。见图。益气解毒方中苯丙素类化合物对鼻咽癌细胞增殖效应的影响鼻咽癌论文。实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增殖取块检测专用板，每孔各加入培养基，置于仪器中测量基线平衡仪器。取对数生长期的细每进行次全板自动图像捕获及分析细胞形态图像，监测细胞生长形态。检测蛋白表达取对数生长期的细胞，传代至细胞培养皿中，细胞贴壁生长后弃去原培养液，加入含药培养基或含溶剂培养基，实验分组同，置于继续培养后提取总蛋白并进行定量，取蛋白配置上样体系。根据检测蛋白分子量配置合适浓度的分离胶和浓缩胶，上样，进行凝胶电泳，转膜，封闭。按照定稀释比例稀释和，过夜孵育，洗涤次，每次，再加入相对应的鼠抗或兔抗，室温孵育，洗涤次，每次，于红外荧光扫描成像系统上扫描显影，检通量活细胞成像分析检测系统分别监测种不同浓度苯丙素类化合物对人鼻咽癌细胞形态改变法检测种苯丙素类化合物对人鼻咽癌细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原连锁的凋亡蛋白抑制剂表达的影响。结果实时监测结果显示异欧前胡素阿魏酸绿原酸均能不同程度地抑制细胞增殖，存在药物浓度越高抑制效应越明显的趋势。检测结果显示，与对照组相比，种苯丙素类化合物作用后，大量细胞出现细胞漂浮死亡，细胞膜破溃细胞结构模糊等形态变化。检测结果显示，与对照组相比，异欧前胡素阿魏酸绿原酸能明显抑制毒方水提物对肿瘤基础与临床，何丹益气解毒方诱导鼻咽癌侧群细胞凋亡的研究长沙湖南中医药大学，蔺婷自噬在益气解毒方诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用研究长沙湖南中医药大学，罗晶婧益气解毒方水提物联合盐霉素抑制鼻咽癌细胞增殖迁移和诱导凋亡的效应长沙湖南中医药大学，王化修，田道法，吴新正益气解毒方对小鼠鼻咽癌癌前病变的逆转作用及其机制探讨山东医药，范婧莹，刘洁，刘晓丹，等益气解毒方通过信号通路对鼻咽癌细胞增殖的影响湖南中医药大学学报，邹攀，刘洁，许红淼，等基于网络药理学探讨黄连和黄芪治疗鼻咽癌的作用机制中国新药与临床杂志，刘洁益气解毒方中苯丙素类化合物对鼻咽癌细胞增殖效应的影响鼻咽癌论文，胰酶消化，制成单细胞悬液，将细胞混匀后接种于板中，每孔细胞悬液，控制细胞密度为个孔，置于培养箱中培养，每组设个复孔。实验分组每个药物分别设对照组和共组。接种后培养约，细胞贴壁生长，弃去原培养液，每孔加入含药培养液，置于培养箱中继续培养，持续监测以上，。监测系统可通过自动计算细胞指数，反映细胞增殖情况其中，表示孔接种细胞后的电极阻抗值，为背景阻抗基线值，进而绘制出细胞生长曲线。根据加药后的均化细胞指数，计算药物相对增殖率，增殖率实验组均化细胞指数对照组均化细胞指胞增殖情况其中，表示孔接种细胞后的电极阻抗值，为背景阻抗基线值，进而绘制出细胞生长曲线。根据加药后的均化细胞指数，计算药物相对增殖率，增殖率实验组均化细胞指数对照组均化细胞指数。表不同化合物不同时间点的值图不同浓度异欧前胡素处理后细胞增殖曲线图不同浓度阿魏酸处理下细胞增殖曲线图不同浓度绿原酸处理下细胞增殖曲线益气解毒方中苯丙素类化合物对细胞形态的影响与对照组饱满均匀，细胞结构完整的细胞形态相比，异欧前胡素阿魏酸及绿原酸处理后的大量细胞出现细胞膜破溃，细胞结构模糊等形态变化。与对照组相比异欧前胡素阿魏酸处理的细胞抑制增应及出现形态异常较早，但抑制增殖效应为者中最弱。种苯丙素类化合物均可损伤细胞，使其细胞形态发生改变。异欧前胡素阿魏酸及绿原酸抑制细胞增殖作用可能通过下调及表达来完成。本研究对益气解毒方中苯丙素类化合物异欧前胡素阿魏酸及绿原酸抑制细胞增殖效应情况进行比较，并且对其机制进行初步研究，揭示益气解毒方的药效物质基础，明确益气解毒方单体有效作用成分，丰富益气解毒方应用于临床的科学理论依据，更好的指导临床用药。今后的实验将探索益气解毒方内主要苯丙素类化合物异欧前胡素阿魏酸及绿原酸抑制细胞增殖的更多分子机制。参考文献测不同处理组间目的条带的信号值，计算相对表达量。实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增殖取块检测专用板，每孔各加入培养基，置于仪器中测量基线平衡仪器。取对数生长期的细胞，胰酶消化，制成单细胞悬液，将细胞混匀后接种于板中，每孔细胞悬液，控制细胞密度为个孔，置于培养箱中培养，每组设个复孔。实验分组每个药物分别设对照组和共组。接种后培养约，细胞贴壁生长，弃去原培养液，每孔加入含药培养液，置于培养箱中继续培养，持续监测以上，。监测系统可通过自动计算细胞指数，反映细胞中增殖相关蛋白的表达。结论益气解毒方中主要苯丙素类化合物异欧前胡素阿魏酸绿原酸均可以不同程度抑制人鼻咽癌细胞增殖，其机制可能与下调增殖相关蛋白的表达有关。多功能细胞成像微孔板检测系统监测细胞形态取对数生长期的细胞，胰酶消化，制成单细胞悬液，每孔细胞悬液接种于孔培养板中，控制细胞密度为个孔，细胞贴壁生长，弃去原培养液，每孔加入含药培养基或含溶剂培养基，实验分组对照组异欧前胡素组阿魏酸组绿原酸组，药物组浓度均为。将孔板放置于检测系统中继续培养，设，胡晶，戴娜，等益气解毒方主要萜类化合物抑制鼻咽癌细胞增殖效应的比较湖南中医药大学学报，殷华芳，钱晓萍，刘宝瑞阿魏酸抗肿瘤作用机制研究进展现代中西医结合杂志，田伟，豆亚伟，王宏涛，等绿原酸诱导肺癌细胞凋亡及其机制研究解放军预防医学杂志，白建伟，王峰，潘鸿，等绿原酸对胃癌细胞增殖及诱导因子表达的影响遵义医学院学报，。摘要目的探讨益气解毒方中苯丙素类化合物异欧前胡素